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如何做出简简单单的WB背景?

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发表于 2018-8-3 15:21:33 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
看文献和网上教程,很多WB条带的背景都是灰灰的甚至带麻点的,我感觉WB结果就该是这样的,后来碰巧看到我在显影的师姐传授了一个小技巧,感觉打开了新世界的大门。【哈哈哈,其实也没这么神奇,夸张一下】。

网上仔细搜索之后是有这类经验介绍的,但是作为实验小白的我最开始查到的protocol们都没有写这一部分,所以此篇仅适用于初学者。

步骤配图如下:

1. 裁一张相当于PVDF膜2.5倍面积的保鲜膜(保鲜膜就用的妙洁的,没有拍照)。

2. 将PVDF膜平铺在保鲜膜上,取ECL发光液A、B各400ul充分混匀后滴于PVDF膜上(视条带多少调整用量,一般1ml足够)。

对折保鲜膜,保证发光液能充分覆盖PVDF膜(实际上对折之后基本上就都可以覆盖了)。摆好位置。

实际上保鲜膜有没有铺的很平整对于成像并没有很大影响,没有大气泡就好了。
3. Image lab 成像

为了有对比效果,我做了保鲜膜覆盖的和直接成像的并且曝光了很长时间,直接看图吧。左边是没有保鲜膜的乌漆嘛黑的条带,右边是使用保鲜膜简简单单的结果,为了显示出效果选的是曝光80s的图。


上图只是为了差别明显一点选了一张曝光时间久的图,这次做的WB本来就比较干净,所以曝光就也只是背景更深了并没有特别丑。师姐过来教我的那次,条带很浅曝光时间长膜背景本来不怎么干净,用了保鲜膜之后看着成像结果目瞪口呆。至于为什么。。。继续目瞪口呆状,没有查到解释,也没有理解什么原理。
下图是我课题汇报的时候用的图,我老板说你这都是ps抠出来的图吧都看不出来是膜照出来的。手动微笑脸,大概或许我们投影效果不太好吧,以至于看不出来这是一条膜。


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